一、公司簡介
Reichert總部位于美國布法羅市,是一家極其卓絕并極具創新性的高科技企業。具有170余年研 發、設計及生產高級
光學儀器及分析儀器的歷史與經驗,并在過去20年里給全球生命科學和藥物 研發等領域用戶提供靈敏和穩健的
表面等離子體(Surface Plasmon Resonance, SPR)儀 器。僅在過去10年,采用Reichert公司SPR技術發表的高質
量文獻多達數百篇。Reichert生命科 學業務部將繼續研發并生產靈敏準確、性價比高的SPR系統,使全球研究
者可以探索并超越 分子間相互作用非標記檢測的極限。
Reichert總部位于美國紐約州布法羅市
獲取數據信息
圖1.Reichert SPR技術獲取數據信息
應用領域
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濃度測定:可測定生物活性分子(蛋白、抗體、細胞因子、生物標志物等)及(小分子化合物、農藥殘留、毒素等)準確濃度
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是否結合(Yes/No):可快速判斷分子間是否存在結合
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親和力測定(KD):可準確測定分子間從mM到pM范圍親和力
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動力學測定(KD, Ka, Kd) :通過實時動力學方式提供分子間結合快慢信息,除了提供親和力信息外,還可呈現結合常數和解離常數
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熱動力學分析( △H,△S):熱動力學分析可提供分子間結合深層次機理,判斷焓驅動或熵驅動結合,有助于藥物創新設計
應用類型
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蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
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完整細胞-分子相互作用
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抗體-抗原相互作用
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抗體篩選,表位篩選
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疫苗、納米材料、聚合物
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脂質體(Liposome)、外泌體(exosomes)、病毒、病毒樣顆粒(VLPs)
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熱動力學分析 (△H & △S)
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活性濃度分析
樣品類型
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常規樣品:如蛋白、核酸、小分子、細胞上清、細胞裂解液上清等
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完整細胞:可研究蛋白與完整原核及真核細胞、以及膜性成分(包括細胞膜)之間相互作用
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血液:直接檢測血液樣品,減少處理步驟,排除純化過程對樣品的影響
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細胞裂解液、噬菌體、膠體金顆粒、納米材料等
應用案例
圖2. 大分子相互作用(HSA與anti-HSA相互 圖3. 小分子相互作用(CAII與95Da小分
作用) 子Methanesulfonamide相互作用)
kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1, kon = 3.92 ×102 M-1s-1,
KD=6.62nM koff = 2.56×10
-1 s
-1,KD = 652 μM
圖4. SPR-熒光顯微鏡聯用(HEK細胞與纖維 圖5. DNA( T-bulge)與鋅指復合物相互作用
原蛋白相互作用) kon=4.68×10
3M
-1s
-1,
kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1, koff=1.7×10-1s-1,
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×10
3 M
-1s
-1, KD=36.4μM
koff2 = 2.5×10
-4 s
-1,KD2 = 26.4 nM
圖6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1 圖7. 酶抑制劑的熱動力學研究(4-CBS與
與生長素轉運抑制劑NPA相互作用) CAII在20℃(藍線)及35℃(紅線)結合
KD=105μM 的溫度依賴信號曲線,ΔH為-6.0kcal/mol 。
圖8. 納米顆粒相互作用(納米金顆粒修 圖9. 納米顆粒相互作用(AP1修飾的
飾的多肽與其抗體相互作用) 納米籠狀顆粒與IL-4的相互作用)
kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1,
KD=0.30nM
圖10. SPR-電化學聯用(電壓對生物素標 圖11. 化學溶液研究(CaCl2溶液對羧甲基
記的短肽與鏈霉親和素相互作用的影響) 纖維素吸附的影響)
圖12A. 細菌相互作用(通過細菌特異 圖12B. 細菌相互作用(分析菌落生長數)
性抗體捕獲細菌)
直觀易用的軟件
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數據分析處理:動力學分析曲線擬合至少5種模型可選:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
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數據分析可采用結合速率或結合信號,實驗數據也可直接導入其他專業數據分析軟件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析結果支持多種輸出格式,Excel,JEPG等
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數據采集和顯示:數據采集軟件可用于實驗方法創建、保存和運行,并能自動化控制檢測模塊、進樣器、注射泵等,可自行計算非常規溶劑或現行緩沖液的溫度系數,精確控制樣品倉溫度和樣品檢測溫度,實現長時間無人值守自動化檢測,按照實驗要求完成熱動力學檢測等,檢測過程中實時顯示所有步驟曲線
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支持監管法規環境,符合GxP和21 CFR Part 11
種類豐富的各種芯片
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傳感器芯片:≥12種,包括裸金芯片、固定生物素化ligand芯片、固定脂質體的芯片、捕獲細胞的芯片、特殊的捕獲芯片以及客戶自定義芯片
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具有捕獲標記生物素的SA芯片和對應試劑盒
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捕獲帶His標簽蛋白的NTA芯片
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具有捕獲細胞的芯片
靈敏度高,數據可靠
ReichertSPR可為藥物研究、藥物發現、抗體篩選、蛋白結構/功能、基因調控及系統生物學研究等提供至關重要的定量信息,可提供如下高質量、高可信度數據:
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嚴謹的動力學分析,結合速率/解離速率-影響治療性候選分子適用性及劑量的生物學學位重要指標。
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親和力范圍從極弱到極強(1mM到1pM)。使得研究細微和強效生物學通路以及更多療法選擇成為可能。
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極低的噪音和基線漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基線漂移0.1μRIU/分鐘。
可選擇升級特殊流路,拓展應用
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默認配置標準流路,可滿足從小分子到細胞在內的大多數應用
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采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展應用能力:電化學流路、石英窗流路(可引入第二光源),在檢測SPR數據的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性(兼容光學顯微鏡)、質譜流路(用于鑒定結合到芯片表面的分子)。
獨特應用
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電化學流路:流路中興趣分子可引發芯片表面的電化學變化,記錄SPR信號數據的同時進行SPR/電流分析、SPR/脈沖伏安法、SPR/循環伏安法,并可檢測聚合物的形成和其他新的應用
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光化學/熒光流路:引入第二光源,在檢測SPR數據的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性(兼容熒光顯微鏡)
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質譜流路(SPR-MS):用于鑒定結合到芯片表面的興趣分子