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Reichert 4SPR/2SPR

一、公司簡介

Reichert總部位于美國布法羅市,是一家極其卓絕并極具創新性的高科技企業。具有170余年研 發、設計及生產高級

光學儀器及分析儀器的歷史與經驗,并在過去20年里給全球生命科學和藥物 研發等領域用戶提供靈敏和穩健的

表面等離子體(Surface Plasmon Resonance, SPR)儀 器。僅在過去10年,采用Reichert公司SPR技術發表的高質

量文獻多達數百篇。Reichert生命科 學業務部將繼續研發并生產靈敏準確、性價比高的SPR系統,使全球研究

者可以探索并超越 分子間相互作用非標記檢測的極限。

Reichert總部位于美國紐約州布法羅市

獲取數據信息

圖1.Reichert SPR技術獲取數據信息

應用領域
  • 濃度測定:可測定生物活性分子(蛋白、抗體、細胞因子、生物標志物等)及(小分子化合物、農藥殘留、毒素等)準確濃度
  • 是否結合(Yes/No):可快速判斷分子間是否存在結合
  • 親和力測定(KD):可準確測定分子間從mM到pM范圍親和力
  • 動力學測定(KD, Ka, Kd) :通過實時動力學方式提供分子間結合快慢信息,除了提供親和力信息外,還可呈現結合常數和解離常數
  • 熱動力學分析( △H,△S):熱動力學分析可提供分子間結合深層次機理,判斷焓驅動或熵驅動結合,有助于藥物創新設計
應用類型
  • 蛋白-蛋白/核酸/糖/脂/小分子相互作用
  • 完整細胞-分子相互作用
  • 抗體-抗原相互作用
  • 抗體篩選,表位篩選
  • 疫苗、納米材料、聚合物
  • 脂質體(Liposome)、外泌體(exosomes)、病毒、病毒樣顆粒(VLPs)
  • 熱動力學分析 (△H & △S)
  • 活性濃度分析
樣品類型
  • 常規樣品:如蛋白、核酸、小分子、細胞上清、細胞裂解液上清等
  • 完整細胞:可研究蛋白與完整原核及真核細胞、以及膜性成分(包括細胞膜)之間相互作用
  • 血液:直接檢測血液樣品,減少處理步驟,排除純化過程對樣品的影響
  • 細胞裂解液、噬菌體、膠體金顆粒、納米材料等

應用案例

圖2. 大分子相互作用(HSA與anti-HSA相互                                           圖3. 小分子相互作用(CAII與95Da小分
作用)                                                                                            子Methanesulfonamide相互作用)
kon=1.77×105M-1s-1,koff=1.17×10-3s-1,                                      kon = 3.92 ×102 M-1s-1,
KD=6.62nM                                                                                    koff = 2.56×10-1 s-1,KD = 652 μM


圖4. SPR-熒光顯微鏡聯用(HEK細胞與纖維                                             圖5. DNA( T-bulge)與鋅指復合物相互作用
原蛋白相互作用)                                                                               kon=4.68×103M-1s-1
kon1 = 2.4 ×103 M-1s-1,koff1 = 8.5×10-3 s-1,                                koff=1.7×10-1s-1,
KD1 = 3.54 μM;kon2 = 9.7×103  M-1s-1,                                        KD=36.4μM
koff2 = 2.5×10-4 s-1,KD2 = 26.4 nM

圖6. 植物蛋白相互作用(植物蛋白TWD1                                      圖7. 酶抑制劑的熱動力學研究(4-CBS與

與生長素轉運抑制劑NPA相互作用)                                             CAII在20℃(藍線)及35℃(紅線)結合

KD=105μM                                                                                  的溫度依賴信號曲線,ΔH為-6.0kcal/mol 。

圖8. 納米顆粒相互作用(納米金顆粒修                                           圖9. 納米顆粒相互作用(AP1修飾的

飾的多肽與其抗體相互作用)                                                        納米籠狀顆粒與IL-4的相互作用)

kon=6.9×106M-1s-1 kon=5.25×105M-1s-1 koff=1.55×10-4s-1,

KD=0.30nM

圖10. SPR-電化學聯用(電壓對生物素標                                                    圖11. 化學溶液研究(CaCl2溶液對羧甲基

記的短肽與鏈霉親和素相互作用的影響)                                                    纖維素吸附的影響)


圖12A. 細菌相互作用(通過細菌特異                                                      圖12B. 細菌相互作用(分析菌落生長數)

性抗體捕獲細菌)


直觀易用的軟件

  • 數據分析處理:動力學分析曲線擬合至少5種模型可選:1:1model,1:2model,2:1model, mass transport model,2-state model等
  • 數據分析可采用結合速率或結合信號,實驗數據也可直接導入其他專業數據分析軟件如Scrubber,Clamp,TraceDrawer等,分析結果支持多種輸出格式,Excel,JEPG等
  • 數據采集和顯示:數據采集軟件可用于實驗方法創建、保存和運行,并能自動化控制檢測模塊、進樣器、注射泵等,可自行計算非常規溶劑或現行緩沖液的溫度系數,精確控制樣品倉溫度和樣品檢測溫度,實現長時間無人值守自動化檢測,按照實驗要求完成熱動力學檢測等,檢測過程中實時顯示所有步驟曲線
  • 支持監管法規環境,符合GxP和21 CFR Part 11
種類豐富的各種芯片
  • 傳感器芯片:≥12種,包括裸金芯片、固定生物素化ligand芯片、固定脂質體的芯片、捕獲細胞的芯片、特殊的捕獲芯片以及客戶自定義芯片
  • 具有捕獲標記生物素的SA芯片和對應試劑盒
  • 捕獲帶His標簽蛋白的NTA芯片
  • 具有捕獲細胞的芯片
靈敏度高,數據可靠
ReichertSPR可為藥物研究、藥物發現、抗體篩選、蛋白結構/功能、基因調控及系統生物學研究等提供至關重要的定量信息,可提供如下高質量、高可信度數據:
  • 嚴謹的動力學分析,結合速率/解離速率-影響治療性候選分子適用性及劑量的生物學學位重要指標。
  • 親和力范圍從極弱到極強(1mM到1pM)。使得研究細微和強效生物學通路以及更多療法選擇成為可能。
  • 極低的噪音和基線漂移,噪音水平0.05μRIU(RMS),基線漂移0.1μRIU/分鐘。

可選擇升級特殊流路,拓展應用
  • 默認配置標準流路,可滿足從小分子到細胞在內的大多數應用
  • 采用Reichert SPR具有的特殊流路拓展應用能力:電化學流路、石英窗流路(可引入第二光源),在檢測SPR數據的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性(兼容光學顯微鏡)、質譜流路(用于鑒定結合到芯片表面的分子)。
獨特應用
  • 電化學流路:流路中興趣分子可引發芯片表面的電化學變化,記錄SPR信號數據的同時進行SPR/電流分析、SPR/脈沖伏安法、SPR/循環伏安法,并可檢測聚合物的形成和其他新的應用
  • 光化學/熒光流路:引入第二光源,在檢測SPR數據的同時研究興趣分子光化學變化或熒光屬性(兼容熒光顯微鏡)

  • 質譜流路(SPR-MS):用于鑒定結合到芯片表面的興趣分子





利用Reichert發表的相關文章

Reichert SPR分子相互作用儀是利用經典SPR原理獲得得到分子相互作用過程中量化數據的設備。該設備可檢測的樣品既包括了經典的抗體-抗原,也包括了核酸、糖類和螯合物等分子類型。近期有多篇利用Reichert SPR設備得到實驗結果的高質量文獻發表。


1、2018年,Ekaterina V. Filippova等利用Reichert 4SPR在mBio上發表題為Structural Basis for DNA Recognition by the Two-Component Response Regulator RcsB的文章,文中結構分析結果與體外結合分析的結果相結合,為蛋白質調控機制提供了有價值的見解,證明了RcsB如何識別目標DNA序列,并揭示了一種獨特的寡聚狀態,使RcsB能夠形成同源和異源二聚體。這些信息將幫助我們了解RcsB在細菌中轉錄調控的復雜機制。RcsB-DNA復雜結構為RcsB的轉錄調節機制的結構基礎提供了深入的見解,并為抗革蘭氏陰性病菌的新型抗菌化合物的設計提供了一個平臺。


2、2018年,Raluca ?tef?nescu等利用Reichert‐Ametek 2Ch‐7500(即現在的Reichert 2SPR)在Journal of Peptide Science上發表題為Molecular characterization of the β‐amyloid(4‐10) epitope of plaque specific Aβ antibodies by affinity‐mass spectrometry using alanine site mutation的文章,文中報道了為確定與抗體結合的氨基酸殘基的功能意義,Aβ-表位序列中丙氨酸單堿基突變對抗原-抗體相互作用的產生影響。這些結果在闡明結合機制和提高療效的Aβ-特異性抗體發展方面提供了有價值的信息。作者鑒定了單克隆抗體和多克隆抗體對β-淀粉質斑塊特異性抗原表位的識別至關重要的氨基酸殘基,這表明抗體在阿爾茨海默病(AD)治療方法發展中的特殊價值。


3、2018年Samantha J. Katner等利用Reichert SR7500DC (即現在的Reichert 2SPR)在Inorganic Chemistry 上發表題為Comparison of Metal?Ammine Compounds Binding to DNA and Heparin. Glycans as Ligands in Bioinorganic Chemistry的文章,文中結果擴展了我們對生理相關水合金屬陽離子與肝素配位化合物相互作用定義的理解。


4、2018年,Anna Kidakova等利用Reichert SR7500DC(即現在的Reichert 2SPR) 在Reactive and Functional Polymers上發表題為Preparation of a surface-grafted protein-selective polymer film by combined use of controlled/living radical photopolymerization and microcontact imprinting的文章,文中提出的簡單的合成策略為基于分子印跡的傳感系統的發展提供了一種前瞻性的解決方案,可用于臨床檢測與多種疾病相關蛋白質,如腎臟疾病、癌癥等。


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