密度梯度分離方法是分離生物大分子常用的方法,其顯著特點是獲得的樣品純度高。但是實驗步驟復雜,尤其是密度梯度制備過程,人工操作重復性差。因此,急需全自動程序化設備來提高實驗重復性、準確性及工作效率。
加拿大BioComp公司生產的密度梯度制備儀和分離儀成為密度梯度制備的金標準,為廣大科研工作者提供了巨大的幫助。如下是近期使用Biocomp儀器在國際期刊上發表相關文獻。
1、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發表《同源六聚體T3SS ATPase-central復合體的Cryo-EM結構顯示出旋轉的ATPase-like非對稱性》的文章中進行EscN-EscO復合物的甘油梯度離心時,(1)使用BioComp梯度制備儀,用EscNEscO-ADP-AlF3緩沖液,制作10-25%的甘油梯度。(2)使用Biocomp分離儀將梯度分為14個餾分(3)用Biocomp紫外檢測器檢測分離的樣品并進行電泳。
2、2019年1月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發表《GAPDH的Malonylation是巨噬細胞的炎癥信號》的文章中進行多核糖體分析時,(1)使用Biocomp儀器制備蔗糖梯度。(2)使用Biocomp儀器檢測單個多核糖體組分。
3、2019年2月《NATURE COMMUNICATIONS》雜志上發表《在哺乳動物細胞中基因表達水平的精確調節》的文章中進行多核糖體分析時,(1)使用Biocomp儀器制備10–50%(w/v)蔗糖梯度。(2)使用Biocomp儀器從頂部分離梯度。
4、2019年2月《Scientific Reports》雜志上發表《Ribosome profiling analysis of eEF3-depleted Saccharomyces cerevisiae》的文章中進行多核糖體概要分析時,(1)使用Biocomp梯度制成7–45%線性蔗糖梯度。(2)使用Biocomp檢測儀器測量260nm下的連續吸光度,分析梯度成分。
5.Biocomp設備工作的流程圖如下:
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